论文纲要:α-环糊精葡萄糖基变化酶的产品潜心性变革及催化学工业机械理接洽
环糊精葡萄糖基变化酶(Cyclodextrin glycosyltransferase,简称CGT酶,EC 2.4.1.19)是一种不妨催化小粉天生环糊精(cyclodextrin, CD)的胞外酶。环糊精依附其能包括客体分子的特出构造,被越来越广的运用在食物、医药、化装品等范围,而消费环糊精所必定的CGT酶也仍旧变成现在接洽的热门。 一切已知的CGT酶催化小粉城市天生α-、β-、和γ-CD三种产品,而且因为α-CD的水溶性优于β-CD,所以,普及CGT酶α-CD潜心性的接洽尤为要害。正文在试验室生存的一株高α-CD奇异性的渐变体菌株Tyr167His(来自软化芽孢杆菌Bacillus sp. 602-1)普通上,建立了H167-deletion,H167HH,和H167HHH三种渐变体。截止表露,跟着167位点组氨酸数目的增加,产品中α-CD的奇异性巩固,H167HHH渐变体变化1%可溶性小粉产品的α/β值不妨到达13.2±0.1,基础上到达只产简单α-CD的手段。贯串SWISS-MODEL构造模仿和分子能源学模仿,本接洽对其催化学工业机械理举行领会释。其余,本接洽将高α-CD奇异性的H167HHH渐变酶举行纯化,对其酶学本质、变化生小粉的前提及发端发酵前提举行了探求。并以H167HHH渐变体为动身菌株,连接举行一系列确定地点渐变,最后赢得α-CD潜心性有所普及的渐变体Y89R/Y195F。结果,对Y167H渐变体举行结束晶接洽和构造领会。 综上所述,正文赢得了高α-CD奇异性的渐变体,深刻、所有地接洽了α-CGT酶产品潜心性,为CD产业化消费供给了扶助,为此后对准α-CGT酶的接洽供给了有力的扶助。