论文摘要:雌性棕色田鼠生殖腺发育和动情周期的内分泌调控初探
摘要:本研究运用组织学方法观察了棕色田鼠(Microtus mandarinus)卵巢、子宫的胚后发育变化以及催产素和雄激素对棕色田鼠卵巢和子宫结构的作用,旨在探讨雌性棕色田鼠生殖发育的规律以及两种激素对棕色田鼠生殖结构的影响。 并采用免疫组织化学方法研究了棕色田鼠动情周期中卵巢子宫中雌二醇及其β受体的变化;催产素和雄激素作用后对卵巢子宫中这种激素及其受体表达的影响。试图探讨棕色田鼠动情周期内分泌调控以及催产素和雄激素对雌性生殖的影响。
1.棕色田鼠卵巢子宫胚后发育组织结构研究:选用出生后5日龄、10日龄、15日龄、20日龄、30日龄、45日龄、60日龄七组棕色田鼠,每组六只,进行形态学观察。结果显示随着日龄的增加,卵泡数由多变少,卵泡类型由单一变复杂。出生后5d的卵巢含有很多原始卵泡,10d卵泡膜形成,出现间质腺,15d出现透明带,20d有的卵泡已有卵泡腔、卵泡液,成为次级卵泡。30d可以看见明显的卵丘。45d出现成熟卵泡,并可见多个黄体。60d卵巢已经完全发育成熟。由此推测,棕色田鼠在45日龄左右进入青春期,60日龄左右达到性成熟。子宫发育和卵巢发育基本同步。
2.动情周期棕色田鼠卵巢子宫的组织学研究:间期,卵巢中有很多次级卵泡,几乎没有大中型的有腔卵泡。子宫内膜薄,子宫腔小。动情期,卵巢内有许多的有腔卵泡及大小不等的黄体。4~6成熟卵泡突出于卵巢表面。子宫腔扩张,腺腔扩张,内膜异常增厚。产后动情期,卵巢中有2~3个成熟卵泡及多个大型黄体子宫腔径较扩张,腺腔不太明显,内膜增厚。
3.雌二醇及其受体在动情周期卵巢中的表达:本实验结果表明棕色田鼠卵巢中雌二醇的含量随动情周期的变化而明显变化,动情期雌二醇的表达最高,间期的雌二醇表达最低,而且动情期和间期有极显著差异。棕色田鼠卵巢中的ERβ也是呈周期性变化的,间期表达弱,而动情期表达增强。推测可能因为动情期卵巢上的卵泡发育较快,体积增大,雌激素分泌逐渐增加到最高水平,而间情期,卵巢内的卵泡发育较慢,而雌激素水平较低,所以造成ERβ表达的变化。
4.雌二醇及其受体在动情周期子宫中的表达:本研究结果表明棕色田鼠子宫中的ERβ表达也是呈周期性变化,即间情期表达弱,动情期表达增强,推测这可能和雌激素的变化有关系,棕色田鼠子宫中的雌激素表达也呈周期性变化,而且同样是间情期表达弱,动情期表达增强,这和ERβ的表达是一致的。
5.棕色田鼠产后动情与自然动情的比较:本实验利用免疫组化技术观察了动情期和产后动情的棕色田鼠卵巢子宫内雌激素及其受体的表达。结果显示雌激素表达和ERβ表达都没有显著性差异。这说明棕色田鼠产后动情期的雌激素及ERβ水平与动情期的雌鼠水平相当,推测棕色田鼠产后动情的特征可能与体内雌激素水平的变化有关。
6.催产素对棕色田鼠雌性生殖的影响:利用组织学方法观察幼体注射催产素后,成体棕色田鼠卵巢、子宫结构的变化。结果显示注射OT后,卵巢内有的卵泡呈囊性扩张, 黄体较多且大。子宫内膜厚度显著变薄,子宫腺腔也是显著性变小。本文还首次利用免疫组化技术观察了幼体注射催产素后,成体棕色田鼠卵巢、子宫雌激素及其受体的变化。结果显示催产素作用后棕色田鼠卵巢雌二醇表达及雌激素β受体表达显著性降低,而子宫中雌二醇表达及雌激素β受体表达极显著性降低。说明幼体注射催产素对成体后卵巢子宫雌激素及其β受体水平有着一定的影响。推测幼体外源性OT会抑制成体雌激素及其β受体水平。总之,本实验研究表明,幼体外源性催产素对成年后棕色田鼠卵巢子宫不论是结构还是激素和受体水平,都有一定的影响。
7.雄激素对棕色田鼠雌性生殖的影响:本实验利用组织学技术以及免疫组化技术观察了棕色田鼠幼体注射丙酸睾酮后,成体卵巢、子宫组织结构和雌激素及其受体的变化。结果显示,丙酸睾酮作用后卵巢内卵泡多数呈囊性扩张, 颗粒细胞层明显减少, 黄体较少。子宫内膜厚度极显著减小,子宫腔内径和腺内径也是显著性减小。棕色田鼠卵巢子宫中雌二醇表达及雌激素β受体表达均极显著性降低,说明棕色田鼠幼体外源性丙酸睾酮会抑制成体雌激素及其β受体水平,有可能造成不育。