论文摘要:葛花中异黄酮化学成分研究
中药葛根为豆科葛属植物野葛(pueraria lobata(Willd.)Ohwi)或甘葛(pueraia thomsonii Benth)的干燥根,其主要有效成分为异黄酮化合物。近年来,人们开始关注于葛 属植物的藤和花。葛花(Flowers Pueraria)为野葛或甘葛的干花蕾,又名葛条花,是我国的 传统药物,其性味甘平,善解酒毒,醒脾和胃解渴,适用于饮酒过度,头痛、发热、烦渴、 胸膈胞胀、不思饮食、呕吐酸水等症,民间一直作为理想的解酒之药,长期以来被用于缓 解酒后呕吐等症状。本文对野葛花中异黄酮化学成分进行了研究。 首先,采用了硅胶柱层析法对野葛花乙酸乙酯提取部位进行了分离,用氯仿一甲醇 (1O:1→2:1)作为洗脱剂进行梯度洗脱。分离得到了7个异黄酮化合物,经IR谱、|ˉH NMR 谱和ˉ13CNMR 谱鉴定分别为尼泊尔鸢尾异黄酮、次葛花苷、葛花苷、芒柄花素、大豆甙元、 染料木素和大豆甙元一8一碳一芹菜糖一葡萄糖甙。 其次,建立了反相-高效液相色谱法同时测定野葛花中葛花苷、次葛花苷和尼泊尔鸢尾 异黄酮含量的分析方法。色谱柱:Hypersil ODS(25O mm×4.O mm,5μm),流动相:甲醇一 O.1%柠檬酸水溶液梯度洗脱,检测波长265 nm,流速1.100 mLminˉ-1,柱温为3O°C。葛花 苷、次葛花苷和尼泊尔鸢尾异黄酮的平均加样回收率分别为99.87%、1O0.1O%和1O0.21%, RSD分别为O.58%、O.69%和O.80%(n=5)。三个化合物均在O.02~O.4 mg/mL浓度与峰面 积积分值呈良好线性关系。本法可使样品中各测定组分得到很好分离,精密度和重现性好, 简便、可靠。 本文第三部分,设计了4因素3水平正交实验,以葛花苷为指标用反相-高效液相色谱 法测定含量、水作溶媒,考察了影响提取效果的提取方法、固液比、提取时间和提取次数 4个单因素。结果表明这4个因素对野葛花提取效果的影响程度从高到低依次为提取次数, 提取方法,固液比和提取时间。结合生产实际,确定了野葛花的最佳提取工艺为加入6倍 量的水超声提取3次,每次40min。另外还初步进行了葛花苷的纯化实验。 最后,研究了尼泊尔鸢尾异黄酮对小鼠断头后致急性脑缺氧、小鼠腹腔注射亚硝酸钠 造成组织缺氧、小鼠腹腔注射异丙肾上腺素后置密封的广口瓶中造成心肌特异性缺氧后呼 吸持续时间的影响。实验结果显示,尼泊尔鸢尾异黄酮可以有效地延长缺氧动物死亡时间, 具有较明显的抗缺氧作用。 本论文对野葛花中异黄酮化合物进行的分离和鉴定,为进一步研究和开发野葛花这一 自然资源提供了依据;建立的高效液相色谱法测定野葛花中三种异黄酮含量的分析方法, 可用于野葛花质量控制;确定的野葛花中葛花苷最佳提取工艺条件,为工业化生产葛花菅 或尼泊尔鸢尾异黄酮提供了实验依据:对尼泊尔鸢尾异黄酮进行的抗缺氧生理活性实验, 为尼泊尔鸢尾异黄酮的临床应用提供了实验依据。