论文摘要：原癌基因kit、myc在多伊棺头蟋（Loxoblemmus doenitzi）配子发生中的特异性表达及受精囊的显微结构研究

在动物漫长的进化历程中，昆虫纲作为动物界种数最多的一类，约占动物现存种的五分之四。昆虫以其强大的繁殖能力，遍布地球的每个角落。因此，在昆虫生殖生理方面进行研究将有助于深入了解昆虫的生殖调控机理，有助于人们更加有效地利用如此丰富的昆虫资源。 本论文以直翅目、螽斯亚目、蟋蟀总科、蟋蟀科的多伊棺头蟋(Loxoblemmus doenitzi)为材料，采用压片法-改良苯酚品红染色，研究了精子发生过程中的减数分裂阶段和精子形成，发现初级精母细胞第一次减数分裂后几乎不经过间期Ⅱ和前期Ⅱ直接进入中期Ⅱ。为进一步了解雌雄个体交配后精子在受精囊内的存活的机制，采用H-E法，在光镜水平上研究了受精囊的显微结构。与中华稻蝗相似，受精囊由内向外也可分为六层，但上皮层仅有一种腺细胞。分泌物为嗜碱性物质，经分泌小管进入囊腔，可能对为保存精子和保证精子进一步完成发育提供了微环境。 为了解多伊棺头蟋配子发生的调节机理，采用免疫组织化学方法，研究了原癌基因kit、myc在配子发生阶段的特异性表达。结果表明，Kit在多伊棺头蟋精子发生中期Ⅰ至末期Ⅱ的精母细胞膜上有阳性颗粒，在精巢和受精囊内精子头部残留的细胞质内也有阳性表达；但在出生后卵子发生过程中，发育中的卵母细胞上无阳性表达。Myc在处于减数分裂的中期Ⅰ至末期Ⅱ的精母细胞的细胞质或细胞核内呈阳性表达，在减数分裂后形成的精细胞和受精囊囊壁的上皮细胞的细胞质内也有阳性表达；但在出生后的卵子正常发生过程中无阳性表达，然而在凋亡卵泡的滤泡细胞的细胞质内有阳性表达。Kit是位于细胞膜上的受体酪氨酸蛋白激酶，Myc是位于细胞核内的转录调节因子。在信号转导系统中，Kit是干细胞因子(steel cell factor,SCF)的膜上受体，位于信号级联的上游，而Myc处于下游。精母细胞周围的囊细胞可能合成SCF样蛋白，特异地识别精母细胞膜上的c-Kit受体，并刺激c-Kit发生二聚化、自体磷酸化，激活胞内酪氨酸激酶活性，活化具有"SH2结构域"的靶蛋白，可能通过一系列信号级联，最终激活与减数分裂的相关蛋白或基因。Myc蛋白可能作为c-Kit/SCF信号转导系统的靶蛋白之一，以同源二聚体与Max或Mxil形成异源二聚体作用于靶基因的特有序列，激活或抑制靶基因的转录活性。从实验结果看，Myc蛋白可能在减数分裂中激活相关基因，尤其是在精细胞形成早期可能参与了精细胞内大量的基因转录，还可能参与了受精囊囊壁上皮细胞的分泌活动。