舆论摘要：三种菜蔬病抱病原体的分子特性领会和分子检验和测定接洽

　　西红柿和胡瓜是我国普遍培植的菜蔬品种，若遭到病虫害的侵染，则重要 感化其产量和品质。个中西红柿狄霉病、胡瓜霜霉病及胡瓜白喉是培植地较为常 见的病虫害，爆发一致且妨害重要，其病原均为真菌，在发病前期以惯例本领难 以确诊，常因为确诊的不迭时而形成重要成果。 　　西红柿灰霉病的病原菌是狄葡萄孢(Botrytis cinerea)，胡瓜霜霉病的病原菌为古 巴假霜霉病原菌(Pse udoperonospora cubensis)。胡瓜白喉的病原菌据《华夏真菌 志，白粉菌目》记录生存两种，辨别为瓜类单囊壳(Sphaerotheca cucurbitae)和 笋瓜科白粉菌(Erysiphe cucurbitacearum)，但上海地域致病的病原菌据上海交通 大学农业与底栖生物学院植被病理接洽室样式审定为Sphaerothecafuliginea。 　　内项课题从病原菌动手，领会、挑选西红柿灰霉病、胡瓜霜霉病及胡瓜白喉3 种病原菌苗奇异的分子特性，并创造和评介了分子检验和测定的本领，经过接洽博得的 　　重要截止如次： 　　1.扩大与增加和测定了灰葡萄孢4个地舆株的rDNA－ITS，其序列长度为424bp， GC含量辨别为44.8 1％(hm1)，45.28％(hm2／hm3)和45.05％(hm4)。各局部 的范围参照文件决定：位点1－120为局部ITS1，121—267为完备的5.8 S，268-424 为局部ITS2。4个地舆株间的序列除ITS1区生存3个位点变换外，其余地区无差 异。灰葡萄孢的rDNA－ITS序列与其10个近缘种举行比对，截止表露：灰葡萄孢 与胡豆葡萄孢、Botrytis tulipae和Sclerotinia tetraspora比拟，分别较小，hm4和蚕 豆葡萄孢、Botrytis tulipae比拟辨别有1个碱基分别，等分布在ITS 1，ITS2则完 全沟通；与Sclerotinia tetraspora比拟则有8个位点分别；与其他7个近缘种的差 异较大，序列分别范畴辨别为0.02 5一0.116(ITS 1)和0.013一0.109(ITS2)。 　　2.扩大与增加和测定了灰葡萄孢4个地舆株的P729片断，长度为618bp，GC含量 辨别为47.25％(hm 1／hm3／hm4)和46.76％(hm2)。比拟各地舆株间以及文件报 道的序列(AJ422 103)分别，表露hm l、hm3与文件通讯序列AJ422103实足相l司， hrn2、hm4与之生存分别，辨别坐落位点180／454／475(hm2)，156／180／518(hm4)。 　　3.扩大与增加和测定了狄葡萄孢4个地舆株的28S—D3，所获序列长度为243 bp，灰 葡萄孢4个地舆株的序列实足沟通，与Botrytis tulipae的也实足沟通；而与 Sclerotinia tetraspora 、Botrytis porri仅有1个碱基分辨，与Sclerotinia minor、 Sclerotinia trifoliorum有2个碱基分辨。 　　4.创造了西红柿灰霉病的PCR分子确诊本领，并对该本领举行了精巧性和奇异 ，件评介，截止表露引物p729+／p729－所扩大与增加条带对灰葡萄孢均为奇异，病原菌为 0.2μg时即可赢得确诊。 　　5.运用巢式PCR扩大与增加胡瓜霜霉病原菌3个地舆株的rDNA—ITS，扩大与增加片断奇异 日功效高，测定的序列长度为709bp，GC含量辨别为45.84％(sm l／sm2)和45.70 ％(sm3)。比拟各地舆株间的序列特性，表露sml和sm2实足沟通，sm3在639 赋予sm1／sm2生存1个单碱基变换(G／A)。扩大与增加和测定了胡瓜霜霉病原菌2个地舆 株的28S－D3，序列长度为242bp，GC含量为56.61％，两株的序列实足沟通，不 生存碱基分别。 　　6.运用巢式PCR扩大与增加胡瓜白粉病原菌3个地舆株的rDNA—ITS，赢得的扩大与增加片 段经测序，表露长度为379bp，GC含量为56.73％，囊括局部ITSl，5.8S和ITS2。 3个地舆株的序列实足沟通，无碱基分别，底栖生物消息学领会提醒本接洽的胡瓜白粉 病病原菌应为Sphaerotheca cucurbiatae，与形念鉴其余截止生存冲突，看来上海市 囊括我国的胡瓜白喉病原菌的品种辩别需进一步廓清和决定。