论文摘要：血小板膜糖蛋白GPIb/IX与VWF相互作用的力学研究
目前体外实验表明，在高剪切场（>3000s-1）和可溶状态的von Willebrand 因子（VWF）共同存在的条件下，血小板即可发生不可逆聚集。这种现象称为剪切场诱导的血小板聚集现象（Shear induced platelet aggregation, SIPA）。SIPA现象是生化因素和力学因素的耦合作用的结果。大量实验结果表明血小板膜糖蛋白GPIb/IX/Ⅴ与可溶的VWF发生结合反应导致血小板的活化是SIPA现象第一步。但力学环境对GPIb/IX/V与可溶VWF相互识别反应率的影响以及二者结合后的解离力尚未见到报道。由于GPIb/IX/V与VWF的结合域在GPIb/IX上，故我们选用表达人GPIb/IX的CHO细胞和包被了VWF的兔红细胞进行试验。用微吸管技术研究VWF与GPIb/IX之间相互识别、黏附的反应率与力学环境的关系。利用经过转染可表达人血小板膜糖蛋白GPIb/IX的CHO细胞与包被有VWF的红细胞互相接触并施加一定的外界压力，保持压力一段时间之后根据分开两细胞时红细胞变形与否判断蛋白质识别与否，记录两种蛋白质发生识别黏附的几率，得到外力对这两种蛋白质相互识别反应率的影响。另通过对细胞变形的测量和数据处理得出GPIb/IX与VWF识别后的解离力。携带GPIb/IX和VWF的细胞对心挤压1.5微米，持续30秒的实验状态下，两种蛋白质发生黏附的概率约为20%；而对心挤压0.5微米，持续30秒的实验状态下，两种蛋白质发生黏附的概率约为6%。经过数据分析，该实验结果表明VWF和GPIb/IX的相互识别受到外力的正面影响。结合本课题组得出的SIPAct程度与血小板浓度及碰撞频率具有相关性的试验结果，我们推论：SIPAct中，血小板在剪切场中发生碰撞是血小板活化的途径之一。GPIb/IX与VWF识别后的解离力呈随机分布状态。分布的峰值，即解离力的最可几值为10pN。
