摘要：半枝莲多糖的纯化、结构分析及抗氧化活性

半枝莲为唇形科植被半枝莲Scutellaria barbata D.Don的枯燥全草，散布在我国民代表大会局部地域。半枝莲动作保守的国药具备抗肿瘤、抑菌、解热等活性，其重要化学因素为黄酮类复合物、底栖生物碱、蒸发油及多糖等，多糖是半枝莲中的重要化学因素之一，有多种底栖生物活性，但暂时对半枝莲多糖的辨别纯化及构造本质的接洽通讯甚少。正文接洽了半枝莲多糖的索取、辨别、纯化及硫酸化化装，而且对半枝莲多糖SBP、SBP1、SBP2、SBPⅠ、SBP-L、SBP-L1和SBP-L2的全党外抗氧化活性及其化学构造举行了接洽，为此后半枝莲多糖更深刻的接洽与开拓奠定了普通。接洽截止如次：1. 在单成分试验普通上，安排正交试验优化了半枝莲粗多糖的索取工艺，获得开水索取半枝莲粗多糖的最好工艺参数为：索取温度60 ℃，料液比1:20，索取功夫2 h，索取度数4次，半枝莲粗多糖的索取率为2.82%，并沿用苯酚-硫酸法对多糖含量举行了测定。2. 举行了多糖褪色工艺的接洽，对骨炭、中性氧化铁、大孔吸附树脂AB-8、LSA-21和NKA-9五种褪色剂的褪色本能举行了比拟，居中挑选出了最好的褪色剂为大孔吸附树脂AB-8。经过单成分试验决定了褪色的最好前提是pH为7，温度为40℃，溶液中多糖含量为1046.5 mg/L。沿用最好前提褪色考证，测定多糖的保持率为88.46%，褪色率为90.65%。3. 褪色后的多糖（SBP）沿用季铵盐积淀法（Hexadecyltrimethylammoniumbromide, CTAB）举行辨别，获得半枝莲多糖亚组分SBP1和SBP2。沿用DE-52纤维素离子调换柱层析对多糖SBP举行了分级辨别，获得干洗组分SBPⅠ及用0.1 moL/L NaCl溶液洗脱获得SBPⅡ。运用Sephdex-200柱层析、高效液相色谱、紫外光谱和冻融法对SBPⅠ举行纯度审定，证领会SBPⅠ为构成均一的多糖组分。4. 对多糖举行了硫酸化化装。沿用氯磺酸-吡啶法对半枝莲多糖SBP举行硫酸酯化化装，获得多糖SBP-L，其水溶性较原多糖鲜明普及，经过紫外分光灯光计扫描在262 nm处有接收峰，测得的SO42-浓淡为5.73 mg/mL，代替度为0.35。红外光谱表露在1258 cm-1邻近展示硫酸基（-O-SO3-）的特性接收峰。5. 沿用气相色谱法对半枝莲多糖的单糖组分举行了领会。比拟了硅烷派生化、糖腈派生化法和糖醇派生化三种派生化本领，决定了糖腈乙酰化法为最好的派生化本领；经过单成分试验决定了硫酸水解半枝莲多糖的最好前提为：硫酸浓淡为0.5 mol/L 、体积2 mL、水解功夫12 h、温度100 ℃；气相色谱测定半枝莲多糖SBP由鼠李糖、阿拉伯糖、木糖、甘霖糖、葡萄糖和半乳糖构成，摩尔比为 3.26:0.37:4.85:5.16:4.10:9.47， SBP-L由阿拉伯糖、甘霖糖、葡萄糖和半乳糖构成，摩尔比为0.84:6.67:3.62:5.53，SBP1，SBP2，SBP-L1, SBP-L2 和SBPⅠ都由鼠李糖、木糖、甘霖糖、葡萄糖和半乳糖构成，摩尔比顺序为4.51:5.50:4.86:4.90:8.22，3.25:6.20:5.85:4.05:11.30，3.86:4.39:4.96:4.95:7.73，3.04:6.87:5.51:4.37:10.90，3.53:4.62:7.22:4.08:8.37。6. 运用高效液相色谱测定多糖的分子量，获得半枝莲多糖SBP1、SBP2 、SBPⅠ、SBP-L1和SBP-L2的分子量顺序为：290000Da、340000Da、300000Da、360000Da和390000Da；沿用局部酸水解、高碘酸氧化、Smith降解贯串气相色谱和红外光谱对半枝莲多糖举行构造领会，决定了多糖的构造：SBP1和SBP2糖链贯穿办法都是由β－（1→2）－吡喃葡聚糖及半乳糖形成主链，个中SBP1由（1→3，4，6）－鼠李糖、阿拉伯糖、木糖、甘霖糖和葡萄糖残基构成侧链分支，多糖中（1→6）键、（1→3）键、（1→2或1→4）键摩尔百分比约为9％：22％：69％，SBP2由（1→3，4，6）－鼠李糖、阿拉伯糖、甘霖糖和葡萄糖残基构成侧链分支，多糖中（1→6）键、（1→3）键、（1→2或1→4）键摩尔百分比约为12％：26％：62％；SBPⅠ以β－（1→2，3）－吡喃葡聚糖及半乳糖形成主链，由（1→4，6）－鼠李糖、阿拉伯糖、甘霖糖和葡萄糖残基构成侧链分支，多糖中（1→6）键、（1→3）键、（1→2或1→4）键摩尔百分比约为10.6％：47％：42.4％；SBP-L1以β－（1→2）－吡喃葡聚糖及半乳糖形成主链，由（1→3，4，6）－鼠李糖、阿拉伯糖、木糖、甘霖糖和葡萄糖残基构成侧链分支，共存在小批α－糖苷键型吡喃糖基，多糖中（1→6）键、（1→3）键、（1→2或1→4）键摩尔百分比约为9.6％：38.6％：51.8％；SBP-L2以β－（1→2）－吡喃葡聚糖及半乳糖、阿拉伯糖形成主链，由（1→3，4，6）－鼠李糖、甘霖糖和葡萄糖残基构成侧链分支，多糖中（1→6）键、（1→3）键、（1→2或1→4）键摩尔百分比约为10.6％：24.2％：65.2％。7. 对七种半枝莲多糖（SBP、SBP1、SBP2、SBPⅠ、SBP-L、SBP-L1和SBP-L2）的全党外抗氧化活性举行了接洽：沿用邻苯三酚自氧化本领，测定半枝莲多糖对O2-自在基的控制效率；沿用邻二氮菲-亚铁离子—H2O2体制测定了半枝莲多糖对羟基自在基的控制效率；全党外模仿胃液pH值前提下测定了半枝莲多糖对NO-2废除本领。截止表白，七种多糖均具备各别的抗氧化活性，呈剂量依附联系。半枝莲多糖SBP的抗氧化性要强于辨别后的多糖SBP1和SBP2，硫酸化化装后的多糖SBP-L和SBP-L2的抗氧化性较原多糖SBP和SBP2的抗氧化性巩固，多糖SBP-L1较多糖SBP1对羟基自在基和NO2-的废除功效有所贬低，对O2-自在基废除功效有所普及。正文接洽表白，几种半枝莲多糖都具备各别百分比的β-（1→3）葡聚糖苷键，所以,七种多糖展示各别水平的抗氧化性。