舆论摘要：拟黑多刺蚁（Plyhachis vicina Roher）DopR2基因的克隆与序列领会

摘 要多巴胺是核心神经体例中特殊要害的神经递质之一，遏制着疏通、情绪及神经内渗透的安排，与多种神经体例病症出色关系，很多精力药物经过效率于多巴胺受体表现其效力。多巴胺受体是典范的G-卵白偶联受体，按照对腺苷酸环化酶(AC)生机的各别感化及受体辨别个性(具备潜心性配体)，可分为D1和D2两个受体家属。D1家属囊括D1和D5两个亚型，该类受体与Gs卵白偶联，激活AC；D2家属囊括D2、D3、D4三个亚型，这类受体与D1类受体效率差异，与Gi卵白耦联，对AC起控制效率。两类家属各亚型间的药道学个性各别。拟黑多刺蚁(Plyhachis vicina Roger)属于膜翅目(Hymenoptera)、蚁科(Formicidae)，有雌蚁、雄蚁、兵蚁三个等第，是典范的社会性虫豸，具备普遍的多态局面和搀杂的社会动作。在我国散布普遍，是国度保健部独一指定的食药兼用的蚂蚁，具备极高的养分及药用价格都很，是要害的资源虫豸，是接洽虫豸发育及动作调节和控制体制上面的的杰出资料。本试验以社会性生存的虫豸拟黑多刺蚁为接洽资料，索取其总RNA回转录为cDNA，沿用RT-PCR等本领对拟黑多刺蚁DopR2基因举行了克隆和序列领会，以期为进一步对该受体卵白功效的商量奠定普通。接洽截止如次：1. 从拟黑多刺蚁兵蚁中索取总RNA，回转录为cDNA。按照引物安排规则沿用在顽固区安排简并引物，经过惯例RT-PCR等本领获得拟黑多刺蚁DopR2序列。赢得的一段长为1381bp的基因序列，经过盛开观赏框考证该序列包括一个长度为1329bp的盛开观赏框，源代码一个由442个氨基酸酸构成的卵白质。分子量50.3430KD，表面等电点为9.21。2. 底栖生物消息学对拟黑多刺蚁DopR2卵白构造和功效领会表白，该卵白属于G-卵白偶联受体家属，具备典范的7个跨模电钻构造域。拓扑构造猜测表白该卵白二级构造由α-电钻和无准则弯曲构成，其余再有小批β-折叠构造，α-电钻地方场所与该卵白疏水区和跨模区猜测的场所相符合；猜测的该卵白三级构造表露PvDopR2卵白的5个α-电钻，与跨膜区TM I-TM V地方的地区符合。那些构造域含有多个功效关系位点，如N-糖基化位点、葡萄糖胺黏附位点、酪卵白激酶II盐酸化位点、N-豆蔻酰化位点以及一个G卵白偶联受体标记序列。表白PvDopR2在那些功效构造域是莫大顽固的。3. 从分子进化观点领会创造，虫豸中DopR2间的分别很小，一致性都在60％之上。膜翅目虫豸的DopR2与果蝇的同源性最高。上述虫豸与脊椎众生多巴胺受体各亚型间的一致性低而趋异度较高。鉴于NJ法建立的进化树表露，脊椎众生D1类和D2类受体的同源性较低，而同类受体的各个亚型之间的同源性较高。虫豸间DopR2有很高的同源性，而且与脊椎众生D1类受体的隔绝较D2类的稍近，证明虫豸该受体是D1类受体家属分子，这与虫豸DopR2在药道学上面的接洽普遍。