舆论摘要：玉蜀黍基因组DNA甲基化程度及其与杂种上风联系的接洽

DNA甲基化是表观遗传学的重要展现情势，一致生存于动植被基因组中，介入调节和控制基因的表白，保护基因组的宁静性。DNA的胞嘧啶经过爆发甲基化和去甲基化两个进程，调节和控制动植被的成长和发育。玉蜀黍动作重要的杂交育种资料，体验了从保守育种到分子育种的变化。越来越多的接洽表白植被胚乳的发育遭到母本图章的调节和控制，来自母本的少许基因洪量表白，但是，少许来自母本基因被甲基化化装，其表白遭到控制。所以，对玉蜀黍健将发育进程中基因表白分别的接洽，探求与崇高形势关系的基因，将会无助于于变革玉蜀黍的品德和普及产量。MSAP本领即甲基化敏锐扩增加态性，1998年熊立仲初次运用MSAP本领接洽水稻杂交种F1及其亲本间的各别甲基化形式，该本领是鉴于AFLP本领，采用甲基化敏锐的两个同裂酶，接洽基因组甲基化多态性。因为该本领具备需用小批的DNA，即可检验和测定出甲基化多态性，而且便于操纵，现被广为沿用。本试验采用暂时海内大表面积培植的郑单958为资料，沿用MSAP本领，探求感化其爆发崇高性状的基因。郑单958是以郑58为母本，昌7-2为母本，人为授粉后获得的杂交种，因为其产量高，抗倒悬且抗洪虫害的崇高特性，在黄河道域广为培植。玉蜀黍在授粉15-20天后，胚乳细胞中断分割震动，加入养分物资积聚功夫。暂时，国表里对玉蜀黍授粉后早期的健将甲基化程度的通讯很多，但对健将发育后期养分物资积聚与甲基化化装联系的接洽还未见通讯。本试验取双亲及杂交种F1代在授粉后第28天的健将，用MSAP本领检验和测定基因组胞嘧啶甲基化程度分别，因为基因爆发去甲基化化装后，其表白程度会获得相映普及，故采用爆发去甲基化的片断，克隆后用来测序领会。本接洽重要获得以次截止： 1.         本试验对预扩大与增加和采用性扩大与增加的产品，用1.2%（w/v）的琼脂糖凝胶电泳提早检验和测定，创造预扩大与增加产品成弥漫状，这是因为扩大与增加产品片断巨细逼近，而采用性产品多会合在500bp以次，而且不妨大概看出亲本与杂交种的之间的条带真实生存分别，这大大普及了试验功效。2.         将MSAP获得的带型举行统计和数据领会，截止表白：将MSAP甲基化带型分别为5种典型，A为全甲基化型，B为去甲基化型，C为超甲基化型，D为次甲基化型，E是甲基化升高型，个中以去甲基化型和超甲基化型最为明显，辨别占MSAP总条带数的33.7%和35.8%。3.         对玉蜀黍亲本自交系及杂交各类子CCGG位点的胞嘧啶甲基化程度的领会表白，杂交种的非甲基化率为55%高于中亲值53.3%，杂交种的甲基化程度为20.4%，低于中亲值21.8%，大概是洪量片断爆发了去甲基化所致，由于MSAP带型中去甲基化型占33.7%。杂交种F1代DNA甲基化形式体验了较大的安排，以融合根源双亲的异质基因的共同表白，使得某些基因高效转录，而有些基因转录遭到控制，杂交上风的爆发大概与杂交种F1代基因组DNA甲基化形式的变换与从新安排相关。4.         对F1代健将甲基化遗传形式的领会表白，母本甲基化形式占总条带数的46%，而母本甲基化遗传形式占总条带数的4.8%，证明子代基因组的甲基化遗传主假如来自母本基因组，而个中又以半甲基化形式为主，它占总甲基化条带数的28.9%。5.         采用爆发去甲基化的11条片断用来克隆测序，片断巨细为100bp-300bp之间，与玉蜀黍基因组的同源性领会表白，去甲基化位点多爆发在未知基因的启用子地区和EST序列，个中，E4H6-1源代码一个6盐酸葡萄糖酸内酯酶，介入戊糖盐酸道路；E4H6-3标签对应的基因源代码一个与水稻中 F-box-like family  protein同源的卵白，它介入泛素降解道路的SCF复合物的构成；E2H5-1、E2H5-3、E1H5-1、E3H4-1和 E3H4-2辨别源代码与水稻中同源的功效未知卵白质； E2H5-2、E1H1-3 和E1H3-1序列是玉蜀黍基因组中的分子标签（EST）。