论文摘要：中间蝮蛇毒的蛋白质组学研究

    跟着生人基因组安置(Human Genome Project)的实行，人命科学接洽已加入后基因组期间，其标记之一即是卵白质组学(Proteomics)的兴盛。卵白质动作基因功效的径直实行者，其在一定细胞、构造或器官中的表白形式怎样日益惹起科学家们的关心，卵白质组学也一跃变成人命科学的热门。暂时，卵白质组学在揭穿病症的发病机理、探求肿瘤标记物及接洽药物的效率体制等上面已被广为沿用。蛇毒(Snake venom)是从蛇毒腺中渗透的很多具备药道学活性的功效性酶及多肽的搀杂搀和物。它不妨麻木和杀死猎物，也是开拓新式药物的珍贵资源。跟着卵白质组学的兴盛，以及蛇毒在卵白构成上面的对立大略性，卵白质组学本领在蛇毒接洽上面发端暂露头角。连年来，国表里仍旧接踵有囊括游蛇科(Colubridae)、蝰科［响尾蛇亚科(Crotalini)、蝮亚科(Agkistrodontini)］、镜子蛇科(Elapidae)在前的近70种蛇毒的卵白质组学接洽通讯。审定出了囊括蛇毒非金属卵白酶( Snake venom metalloproteinases，SVMPs)、丝氨酸卵白酶(Serine proteases)、神经毒素(Neurotoxins)、心脏毒素(Cardiotoxins)、富含半胱氨酸的渗透卵白(Cysteine-rich secretory proteins)、神经成长因子(Nerve growth factor，NGF)、L-氨基酸酸氧化酶(L-amino acid oxidase)、缓激肽巩固肽(Bradykinin potentiating peptide，BPP)、肌肉毒素(Myotoxin)在前的很多有意旨的卵白。那些对蛇毒组分的方位接洽截止对于蛇毒的进化、酸中毒调节、抗血小板消费及药物开拓均具备要害意旨。中介人蝮(G. Intermedius)是普遍散布于我国西北地域及华北局部地域的一种毒蛇，也是我国6种蝮蛇酸中毒性最大的一种蝮蛇。暂时，已有新疆、内蒙、青海该蛇为害的通讯。往常对于中介人蝮的样式、众生区系、食性及生态、毒液的生去世学与毒道学等上面已有接洽通讯。但是，于今仍不足对其蛇毒组分的完全接洽，这不只妨害其蛇伤的灵验调节，也是控制其开拓运用的一个瓶颈。为此，本接洽拟以搜集自陕北的中介人蝮蛇毒为资料，应用双向电泳(Two-dimensional gel electrophoresis，2-DE)及基质扶助激光解离遨游功夫质谱(MALDI-TOF MS)本领对其蛇毒举行了卵白质学接洽。截止如次：1.  粗毒中各组分的分子量在94 kDa以内，重要散布在约30 kDa~67 kDa、12 kDa~14 kDa两个范畴，提醒在这两个分子量区间内的卵白质含量充分，高丰度表白。其余，在45.0 kDa~66.2 kDa区间有平淡表白程度的卵白散布。2.  粗毒经基质扶助激光解离遨游功夫质谱(MALDI-TOF MS)本领测定，创造粗毒中低分子量的组分16个，分子量散布在1 kDa~15 kDa之间。3.       经2-DE共同MALDI-TOF MS本领领会，贯串双向电泳卵白质点的表观分子  量及等电点，应用底栖生物消息学本领，探求到22个配合的卵白质点消息，发端审定获得了22种卵白质。那些卵白质重要归属于Ⅲ型非金属卵白酶家属、丝氨酸卵白酶家属、磷脂酶A2家属分子，其余再有L-氨基酸酸氧化酶家属分子、CRISP家属分子、以及少量神经成长因子。那些卵白质的等电点(pI)散布在5.2~8.3之间，分子量散布在14 kDa~60 kDa之间。碱性卵白质最多，中性卵白质次之，碱性卵白质最少。4.  其余，6个卵白质点没有赢得肽品质螺纹(Peptide mass fingerprinting，PMF)图谱，大概旗号品质太差，在数据库中得不到真实配合，所以没辙举行辩别。之上截止表白，中介人蝮蛇毒组分中，重要毒素的分子量散布在14 kDa-67 kDa之间。2-DE共同MALDI-TOF MS领会，共辩别出22种卵白，归属于6个家属，辨别为：Ⅲ型非金属卵白酶、丝氨酸卵白酶、磷脂酶A2、L-氨基酸酸氧化酶、CRISP及神经成长因子。其等电点(pI)散布在5.2~8.3之间，分子量散布在14 kDa~60 kDa之间。个中，碱性卵白质最多，中性卵白质次之，碱性卵白质最少。有6种卵白因未能赢得肽品质螺纹大概肽螺纹品质太差没辙举行辩别。可见，要想赢得完备的卵白质组学截止，还要与其它质谱本领举行贯串，并与来自其它体例性接洽的材料(如cDNA文库)印证。其余，所辩别卵白的功效怎样，还有待于进一步的接洽与表征。