舆论摘要:盾叶薯蓣构造细胞培植的接洽
盾叶薯蓣(Dioscorea zingiberensis C.H. Wright)从属于薯蓣科薯蓣属(Dioscorea)植被,为有年生纠葛草质藤本植被,其根茎中含有充分的薯蓣皂苷元,可用来合成避孕药及甾体荷尔蒙类药物240多种,是一种要害的荷尔蒙类药源植被。以盾叶薯蓣的叶片、茎段、带腋芽的茎段、根茎和花药为资料,体例接洽其构造细胞培植本领,创造其相映的植株复活体例和细胞培植物繁衍体制,并对其褐化局面举行了发端接洽,以及从其培植物中索取灵验因素薯蓣皂苷元,不管是对运用底栖生物本领繁育盾叶薯蓣的崇高种苗仍旧运用细胞培植消费灵验活性物资均有确定的意旨。本试验的截止如次: 1.体例接洽了盾叶薯蓣叶片、茎段、带腋芽的茎段、根茎为外植体的构造培植本领和复活本领,赢得了洪量的滴定管苗。以MS为基础培植基,附加2,4-D 4.0mg/L、BA 1.0mg/L适于带腋芽的茎段愈伤构造的开辟,开辟率为65.7%。附加BA 1.0mg/L或KT 1.0mg/L、NAA 0.1mg/L适于愈伤构造的继代培植,35 d后增殖倍数可达4.2倍安排。在附加BA 4.0mg/L,NAA 0.1mg/L的培植基上,愈伤构造可被开辟爆发丛生芽,分裂率为100%,大概芽可从而发育成苗。分裂的苗或其茎段在以1/2MS为基础培植基,附加IBA 1.0mg/L、NAA 1.0mg/L、BA 0.2mg/L的培植基上适于根的开辟,开辟率在40%之上。 2.对盾叶薯蓣复活体制创造进程中展示的褐化局面举行了发端的接洽,发此刻以1/2MS为基础培植基附加较高浓淡的BA(2.0-4.0mg/L)时,并增添酪卵白0.2mg/L,并在暗培植5 d后再变化在光下培植时,可灵验地提防褐化的爆发,同声减少培植基的硬度和减少继代周期都不妨灵验的提防褐化局面。 3.用盾叶薯蓣的花药为外植体,试验了各别荷尔蒙拉拢对盾叶薯蓣花药培植的感化,发此刻以B5为基础培植基附加2,4-D 8.0mg/L、BA 2.0mg/L的培植基上,可开辟爆发愈伤构造,将愈伤构造移至MS为基础培植基附加ZT 1.5mg/L、NAA 0.3mg/L或BA 4.0mg/L、NAA 0.3mg/L培植基上,均可开辟爆发小批的大概芽。 4.对盾叶薯蓣滴定管苗定植举行接洽,截止创造:当滴定管苗在生根培植基上成长50 d后,待培植基略干,将培植瓶移至天然光下驯化3 d,而后翻开瓶盖,让滴定管苗渐渐符合天然前提,连接炼苗4-6 d,而后举行惯例炼苗。待小苗成长兴盛后,定植于大田中。盾叶薯蓣组培苗定植成活率可达70%安排。 5.接洽了各别品种和浓淡的植被成长安排剂对盾叶薯蓣的愈伤构造中薯蓣皂苷元积聚的感化,发此刻以MS为基础培植基,附加2,4-D 3.0mg/L、BA 1.0mg/L的培植基上,薯蓣皂苷元的含量为0.19%。以此为比较,接洽发此刻独立增添薯蓣皂甙的前体物资--胆固醇0.05mg/L,附加GA3 0.025mg/L大概乙烯利0.050mg/L培植基上的愈伤构造中薯蓣皂苷元的含量有所减少,平均高度出比较愈伤构造中薯蓣皂苷元的含量,辨别为0.36%、0.27%和0.21%。