摘要：人野生型p53抑癌基因在烟草中的遗传转化

生人暗疾中最罕见的基因变换是p53基因渐变，它是癌基因接洽中要害的肿瘤控制基因之一，野生型p53基因与细胞周期的成长安排、细胞变化的安排、DNA复制以及开辟细胞步调性牺牲(apoptosis)有着出色联系。将人野生型p53基因或卵白引入肿瘤细胞是暂时特殊有远景的肿瘤基因调节本领之一。本试验试图将人野生型p53肿瘤控制基因引入香烟植株，使转基因香烟变成该基因表白卵白的底栖生物反馈器，变换保守的药物消费办法，贬低消费本钱，开拓一条消费药用卵白的新道路。 本接洽将人野生型p53基因源代码区与在植被中奇异表白的启用子和中断子贯串,而后将贯穿片断插入载体pCAMBIA2301的HindⅢ和EcoRⅠ酶切位点之间，建立成一个能变化植被并在个中表白人野生型p53基因的带有NPTⅡ和GUS基因的重组体质粒pCAMBIA2301/p53，以香烟无菌苗叶片为外植体，运用叶盘法，经过根癌农杆菌EHA105介导举行变化，发展p53基因变化香烟的接洽。其重要截止如次： 1．创造了以香烟无菌苗叶盘为外植体的遗传变化体制，运用农杆菌介导将p53基因导出香烟，赢得了抗卡那霉素表型和GUS基因表白的转基因复活植株。 2．接洽了头孢曲松钠、头孢哌酮钠、头孢西林钠、头孢唑林钠、头孢拉定五种头孢霉素类抗生素对农杆菌EHA105的控制效率和对香烟愈伤构造的开辟及大概芽产生的感化，在试验前提下头孢曲松钠的抑菌功效最佳，符合浓淡为200mg/L。 3．经构造化学法、Southern杂交检验和测定，表白人野生型p53基因已调整到转基因香烟植株的基因组中，赢得了含人野生型p53基因的香烟变化植株。