舆论摘要：蜻蜒目差翅亚目局部品种线粒体Cyt b基因序列及分子体例学接洽

　　蜻蜓目虫豸既是一类天敌虫豸，又是药用和食用的资源虫豸，同声也 是水体传染水平的引导虫豸之一，在处置“古翅类”体例发育题目上面也是极好 的试验资料。暂时对其样式学、分门别类学、生态学、动作学、心理学、底栖生物地舆学、 细胞分子底栖生物学等多上面举行过接洽。在分子体例学上面，海外接洽者运用线粒 体DNA（mtDNA）的16S rRNA、Cyt b、COI、COIl和12S rRNA基因对蜻蜒目 局部类群举行过体例发育联系的接洽，我国在这上面的接洽尚属空缺，而用Cyt b 基因序列对差翅亚目间的各别类群举行分子体例学接洽在国表里尚无通讯。 本接洽从分子底栖生物学观点动手，以mtDNA的Cyt b基因动作分子遗传标志， 用虫豸Cyt b基因的奇异性引物举行PCR扩大与增加及DNA测序，共赢得蜻蜒目差翅亚 目4科14属19种及束翅亚手段1种为外群共20种蜻蜒21条Cyt b基因局部序列 （576 bp），运用MEGA2.1、PHYLIP3.6a及MrBayes V3.0等关系分子底栖生物学软硬件 举行序列构成领会并建立体例发育树，从分子程度上对差翅亚目蜻科局部类群属 种间联系及差翅亚目局部科间的体例进化联系举行了接洽，获得以次几点论断： 1.在不囊括外群在前的一切品种的2O条Cyt b基因序列中，A+l平衡含量为 69.6％，G+C平衡含量为30.4％，展现出A+T含量远高于G+C含量（蜻科8属 13种：A=31.O％、T=38.6％、C=17.4％、G=13.0％；差翅亚目4科7种：A= 31.3％、T=38.3％、C=17.6％、G=12.8％）。暗号子第三位点A+T平衡含量最高， 第二位点次之，第一位点最小。暗号子第二位点T的运用最一再，第三位点G的 含量最低，反应出Cyt b基因在暗号子的运用上具备偏差性。在氨基酸酸构成上，576 bp的核苷酸共源代码192个氨基酸酸，一切品种均不含半胱氨酸（Cys），惟有19种氨 基酸，个中亮氨酸（Leu）、异亮氨酸（Ile）和苯丙氨酸（Phe）的运用频次较高。 2.在所获的20条Cyt b基因序列中（不囊括外群）核苷酸的替代总体展现为 变换略高于颠换（变换与颠换的比值R=1.2）。各别暗号子位点的核苷酸替代具备 鲜明的分别，在暗号子第三位点，变换与颠换爆发的频次都很高，这是同暗号子 第三位接受较小的进化压力，所爆发的碱基替代较少惹起氨基酸酸的代替相普遍的。 变换主假如T与C之间的变换，而颠换重要爆发在A与T之间，没有C与G之 间的颠换。 3.对蜻科8属13种蜻蜒用几种树立本领所爆发的分子体例树的拓朴构造大 致一致，基天职为4大聚类簇，灰蜻属的品种优先联合，再和宽腹蜻属的品种聚 为第Ⅰ聚类簇：锥腹蜻属和褐蜻属的品种联合为第Ⅱ聚类簇：赤蜻属与脉蜻属、 曲缘蜻属的品种聚为第Ⅲ聚类簇，反馈了这3属的亲缘联系较近；黄蜻属的两个 地舆种群以100％的相信值联合在一道，独力为一枝，坐落体例树的基部，形成聚 类簇Ⅳ。归纳各体例树的截止，不妨反应出蜻科是一个单系群；灰蜻属是较为进 化的一个类群，宽腹蜻属和它的联系迩来；黄蜻属对立较陈旧少许。经过Cyt b基 因576 bp序列建立的百般分子体例树表露，该聚类截止基础和保守分门别类上蜻科各 亚科的分别截止相普遍。蜻科8属各属间的体例发育联系为：（（（（灰蜻属+宽腹蜻 属）+（锥腹蜻属+褐蜻属））+（脉蜻属+（曲缘蜻属+赤蜻属）））+黄蜻属），个中 灰蜻属是较进化的类群。 4.对差翅亚目4科7种蜻蜒用各别树立本领所建立的分子体例树来看，其拓 扑构造实足沟通，4科独力形成4个聚类簇，蜻科的品种联合成第Ⅰ聚类簇，与蜒 科的品种产生姊妹群联系，蜻科和蜒科均构成一个单系的进化分支，春蜓科、大 蜻科各自独力为一支，大蜻科坐落体例树的基部。百般分子体例树的拓扑构造支 持了差翅亚目是单系群的看法。经过序列比拟和进化树领会，倡导将春蜒科提高 为春蜒总科，决定了将大蜻亚科从伪蜻科中辨别出来提高为大蜻科是精确的看法。 差翅亚目4科之间的体例进化联系为：大蜻科→春蜒科→蜒科→蜻科，个中蜻科 是较为进化的类群。 5.应用Cyt b基因的核苷酸序列对蜻蜒目差翅亚目局部类群举行体例进化分 析，截止表露：科内属间的体例联系比拟精确，获得的体例发育树的拓扑构造基 本普遍，且各属间分支的相信值都比拟高，而属内种间的分子进化联系不是很理 想，所以经过该试验不妨看出Cyt b基因在蜻蜒目虫豸中不妨动作灵验的分子遗传 标志举行分子体例进化领会，更符合于举行科、属分门别类阶元之间的体例进化接洽。